一、产品简介
谷丙转氨酶/丙氨酸氨基转氨酶(GPT/ALT)是一种参与人体蛋白质新陈代谢的重要酶,它广泛存在于人体的各种组织
、器官中,其中以肝脏细胞的细胞浆中含量最高。GPT/ALT
在氨基酸代谢及糖、脂肪、酮体的相互转化过程中起着重要作用。
定义与功能:
定义:谷丙转氨酶/丙氨酸氨基转氨酶(GPT/ALT)是一种能够
催化丙氨酸和α - 酮戊二酸之间氨基转移反应,生成丙酮酸
和谷氨酸的酶。
功能:GPT/ALT主要参与体内的转氨基作用,在肝脏的蛋白质
和氨基酸代谢中发挥关键作用。当肝细胞受损时,GPT/ALT
会释放到血液中,导致血清中GPT/ALT活性升高。因此,血清
中该酶的活性是临床上诊断肝脏疾病和评估肝功能的重要指标。
催化机制:
GPT/ALT催化丙氨酸和α - 酮戊二酸发生转氨基反应,生成丙酮
酸和谷氨酸。在这个反应过程中,氨基从丙氨酸转移到α - 酮戊
二酸上,从而实现氨基酸的代谢转换。
活性测定方法:
本试剂盒采用微板法进行谷丙转氨酶/丙氨酸氨基转氨酶(GPT
/ALT)的活性测定。在特定的反应体系中,GPT/ALT催化底物反应
,通过检测特定波长下吸光度的变化来计算酶的活性大小。
吸光度的变化与GPT/ALT的酶活性成正比,通过测定反应体系
中吸光度的变化量,可以间接计算出GPT/ALT的酶活性。
重要性:
GPT/ALT作为肝功能检测的重要指标,其活性的变化对于诊断
和监测肝脏疾病具有重要意义。肝脏疾病(如肝炎、肝硬化等)
、药物性肝损伤、酒精性肝病等都可能导致血清中GPT/ALT活性
升高。通过检测GPT/ALT的活性,医生可以及时发现肝脏的病变
,评估病情的严重程度,并制定相应的治疗方案。
二、所需的仪器和用品
进行谷丙转氨酶/丙氨酸氨基转氨酶(GPT/ALT)活性测定实验时
,需要以下仪器和用品:
酶标仪
用途:用于测量反应体系在特定波长下的光吸收值。酶标仪
具有高精度和高灵敏度的特点,能够准确测定样品在特定
波长下的吸光度值。
注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节波长到合适的
检测波长。同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,以确保测量
结果的准确性。
96孔板(UV板)
用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量测定。UV板
具有透明度高、光吸收性能好的特点,适合用于紫外光区的测定。
注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污染,并且
样品和试剂的加入量要准确。
低温离心机
用途:用于分离样品中的固体和液体成分,提取GPT/ALT。低温
条件有助于保持GPT/ALT的活性,减少其在处理过程中的损失。
注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、时间等)
,并确保离心机已预冷至适当温度。在离心过程中,要密切
关注离心机有无异常声音等状况,若出现异常状况应立即停止离心。
可调式移液器
用途:用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够根据不同
的实验需求调整移液量,确保实验的准确性和重复性。
注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已进行校准,并且
移液过程中要避免气泡和溅出。在移取不同样品或试剂时,要及时
更换移液器头,以防止交叉污染。
研钵
用途:用于研磨样品,使其达到实验所需的粒度。在GPT/ALT活性
测定实验中,研钵可能用于研磨组织等样品,以便提取其中的GPT/ALT。
注意事项:在使用研钵时,要保持其干净无污染,并确保研磨过程
中样品不会受到污染。
冰
用途:用于保持样品在低温条件下,防止其发生降解或变性。在GPT
/ALT活性测定实验中,冰可能用于冷却样品或试剂,以确保实验的准确性。
注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,并及时更换以保持其低温效果。