一、细胞基本属性
细胞名称:5637人膀胱癌细胞(Human Bladder Carcinoma Cell Line 5637)
细胞别称:5637细胞;膀胱癌细胞系
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:成年男性(供体病理诊断为膀胱移行细胞癌)
组织来源:膀胱移行上皮癌组织
生长特性:贴壁生长(需胶原包被培养器皿)
细胞形态:上皮样多角形,成簇贴壁,接触抑制不明显
细胞代数:建议使用P3 - P10代(维持肿瘤特性稳定)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含血清型冻存液)
培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:血清型冻存液(含10% DMSO+90% FBS),液氮长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(受血清浓度影响显著)
供应限制:仅限肿瘤机制研究,禁止临床或体内应用
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬接种
- 培养瓶:酒精消毒表面,静置4小时后换液
传代标准:融合度达90% - 95%(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:5(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
- 传代后6小时需补加培养基防脱水
- 定期检测EGFR表达以确认肿瘤特性
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:基础冻存液(含10% DMSO+40% FBS+50%培养基)
细胞密度:建议冻存浓度:5×10^6 cells/mL
冻存步骤:
- 消化后细胞悬液离心浓缩
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮储存
复苏验证:
- 复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 特性验证:CCK - 8检测24小时贴壁率应>90%
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 到货干冰完全融化导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 72小时内证实交叉污染(需提供STR比对报告)
3. 原代细胞角蛋白19检测阴性
不予重发情形:
1. 未使用胶原包被培养器皿导致贴壁失败
2. 自行更换无血清培养基引发凋亡
3. 未定期检测支原体造成实验室污染
4. 超过建议代数(P10)后出现的特性改变