一、细胞基本属性
细胞名称
143B人骨肉瘤细胞(Human Osteosarcoma Cells)
细胞别称
Hs 863.T;骨肉瘤细胞系;143B细胞
种属来源
人(Homo sapiens)
年龄性别
青少年(性别信息不详,供体为骨肉瘤患者)
组织来源
骨肉瘤组织(原发灶)
生长特性
贴壁生长(依赖高血清培养基支持)
细胞形态
成纤维样梭形,增殖期呈多层重叠生长
细胞代数
P10 - P20(建议使用前10代以内以保证表型稳定性)
细胞规格
1×10^6 cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含血清冻存液)
培养基
DMEM高糖培养基(含10% FBS + 1%双抗)
培养条件
气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
含血清冻存液(含10% DMSO),液氮长期保存
倍增时间
约24 - 36小时(与血清浓度及接种密度相关)
供应限制
仅限基础科研,禁止临床治疗或生物医药开发
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管复苏推荐水浴解冻法:37℃快速解冻后转移至15mL离心管,补加5mL预热培养基离心重悬
培养瓶运输需静置4小时再开盖,避免培养基震荡污染
传代标准
融合度达90% - 95%时传代(建议每2 - 3天观察一次)
传代比例
1:4至1:6(推荐初始密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法
使用0.25%胰酶 - EDTA消化液,37℃作用2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项
终止消化时需添加等体积含血清培养基
避免细胞过度融合导致自发分化
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
基础培养基 + 20% FBS + 10% DMSO
细胞密度
建议冻存浓度5×10^6 cells/mL
冻存步骤
离心收集对数期细胞,冻存液重悬后分装至冻存管
程序降温:4℃平衡30分钟→异丙醇冻存盒 - 80℃过夜→液氮长期储存
复苏验证
复苏后48小时内完成活力检测(台盼蓝拒染率≥85%)
功能验证
建议每季度进行软琼脂克隆形成实验验证致瘤特性
四、售后服务承诺
重发标准
1.到货干冰完全挥发且细胞存活率<80%
2.7日内经STR鉴定显示交叉污染
3.到货72小时内证实真菌/黑胶虫污染
免责条款
1.客户自行改造细胞系后出现表型改变
2.未按推荐密度传代导致的增殖异常
3.使用无血清培养基导致的细胞凋亡
4.液氮罐存储故障导致的冻存管爆裂
(注:所有实验操作需符合生物安全二级实验室规范,建议定期进行支原体检测)