一、细胞基本属性
- 细胞名称:293FT人胚肾细胞(293FT Human Embryonic Kidney Cells)
- 细胞别称:HEK293FT;293FT细胞;SV40大T抗原转染胚肾细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 组织来源:人胚胎肾细胞(经SV40大T抗原转染)
- 生长特性:贴壁生长(依赖胰酶消化传代)
- 细胞形态:上皮样,单层贴壁呈不规则多边形
- 细胞代数:P3 - P10(推荐使用P5 - P8代以保证转染效率稳定性)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含含血清冻存液)
- 培养基:高糖DMEM培养基(含10%胎牛血清+1%青霉素 - 链霉素+1% GlutaMAX)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:含血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:约24 - 48小时(依赖培养密度及传代操作)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或基因治疗产品开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基接种
- 培养瓶:酒精消毒表面后直接置于37℃培养箱平衡4小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:4至1:6(推荐接种密度2×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA溶液,37℃消化1 - 3分钟
- 显微镜下观察细胞边缘收缩后立即加入含血清培养基终止
- 注意事项:
- 避免消化过度(影响细胞膜完整性及转染效率)
- 传代后6小时内避免移动培养瓶以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:含血清冻存液(含10% DMSO及20%胎牛血清)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟 → - 80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞贴壁率(需≥90%)
- 功能验证:荧光报告基因转染效率检测(P5代转染效率应≥80%)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录证明)
- 到货3天内证实支原体污染(需提供第三方检测报告)
- 细胞复苏后贴壁率低于80%(需提供显微图像)
- STR鉴定结果与数据库不符
- 不予重发情形:
- 未按规范使用胰酶消化导致细胞成片脱落
- 使用非推荐培养基(如无血清或低糖DMEM)
- 转染后未及时更换培养基导致毒性累积
- 未定期进行支原体检测引发交叉污染
注:本产品适用于基因过表达、病毒包装等研究,操作时需遵循生物安全二级(BSL - 2)标准