一、细胞基本属性
- 细胞名称：A431人表皮癌细胞
- 细胞别称：A - 431；人表皮癌细胞系
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 组织来源：表皮组织（源自一名85岁女性表皮样癌患者的皮肤）
- 生长特性：贴壁生长（需依赖细胞间接触及基质支持）
- 细胞形态：上皮样多角形，贴壁紧密，可形成多层聚集
- 细胞代数：建议使用P5 - P15代（确保增殖活性与基因稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含胎牛血清冻存液）
- 培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS+1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：胎牛血清冻存液（含10% DMSO）， - 150℃以下长期保存
- 倍增时间：约24 - 36小时（与血清浓度及传代密度相关）
- 供应限制：仅限科学研究，禁止用于临床或生物治疗
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基；培养瓶：酒精消毒后直接置于培养箱，4小时后更换新鲜培养基
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:6（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：使用0.25%胰酶 - EDTA溶液，37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项：避免过度消化导致细胞膜损伤；传代后需间隔48小时进行首次换液
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：完全培养基配制（含20% FBS+10% DMSO）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤：消化后离心收集细胞，重悬于冻存液；程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证：复苏存活率≥90%（台盼蓝染色法）；功能验证：EGFR高表达检测（免疫荧光法确认）
四、售后服务承诺
- 重发标准：1. 干冰耗尽或运输温度异常（需提供物流温度记录）；2. 到货72小时内证实微生物污染（需提供检测证据）；3. 复苏存活率低于85%；4. STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形：1. 使用无血清培养基或自行修改培养体系；2. 未按要求进行定期支原体检测；3. 未在液氮中保存导致反复冻融；4. 超过建议代数继续传代引发变异
