一、细胞基本属性
细胞名称:A498人肾癌细胞
细胞别称:ATCC HTB - 44;人肾腺癌细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:44岁女性(转移性肾癌患者来源)
组织来源:肾上腺样肾癌转移灶(原始病理类型为透明细胞癌)
生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质)
细胞形态:上皮样,单层贴壁呈不规则多边形
细胞代数:P3 - P10(建议使用前5代以保证遗传稳定性)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640基础培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约48小时(受培养基批次及接种密度影响)
供应限制:仅限科学研究,不可用于临床治疗或生物医药生产
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴解冻后转移至15mL离心管,加入5mL预热培养基离心去冻存液
- 培养瓶:酒精消毒表面后直接置于CO₂培养箱复苏
传代标准:融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:2至1:3(推荐初始接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止
注意事项:
- 消化后需轻柔吹打避免细胞碎片产生
- 传代后6小时内避免移动培养瓶以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90% FBS)
细胞密度:建议冻存浓度1×10^6 cells/mL
冻存步骤:
- 离心后弃上清,缓慢逐滴加入预冷冻存液
- 程序降温:4℃平衡30分钟→-80℃过夜→液氮长期保存
复苏验证:
- 复苏后48小时内进行活率检测(台盼蓝染色≥85%)
- 功能验证:CCK - 8法检测增殖曲线(P5代细胞应维持典型生长趋势)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 干冰运输过程中温度异常(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内经检测存在支原体污染(需提供第三方检测报告)
3. 细胞复苏后活率低于80%(需提供染色图片及显微镜观察记录)
4. STR分型与ATCC数据库不匹配
不予重发情形:
1. 使用非推荐培养基导致细胞形态异常
2. 未按规范进行传代造成细胞提前衰老
3. 液氮保存设备故障导致反复冻融
4. 未执行标准支原体预防措施引发污染