一、细胞基本属性
细胞名称:AsPC - 1人转移胰腺腺癌细胞
细胞别称:AsPC - 1;胰腺癌细胞系;转移性胰腺腺癌细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
组织来源:胰腺癌转移灶(源自转移性胰腺癌患者的腹水样本)
疾病特征:高转移性胰腺导管腺癌(具淋巴结转移倾向)
生长特性:贴壁生长(需经胶原包被培养器皿)
细胞形态:上皮样,贴壁后呈不规则多角形,增殖期可见簇状分布
细胞代数:P3 - P10(建议使用P5 - P8代以保证实验一致性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:RPMI 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:约30 - 48小时(受培养基批次及接种密度影响)
供应限制:仅供科研用途,禁止临床治疗或活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
培养瓶:酒精消毒表面后直接置于培养箱静置4小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:4(建议接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
传代后需更换胶原包被的培养器皿
避免频繁观察扰动细胞贴壁过程
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及特异性保护剂)
细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
程序降温:4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期储存
复苏验证:
复苏后48小时检测细胞存活率(台盼蓝染色≥90%)
功能验证:Transwell迁移实验(P5代细胞应保持高侵袭特性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 干冰运输失效导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内经qPCR证实支原体污染
3. STR基因分型与数据库不匹配
4. 复苏后活率低于85%(需提供染色检测视频)
不予重发情形:
1. 使用非指定培养基或未胶原包被培养器皿
2. 擅自修改消化时间导致细胞膜损伤
3. 未按要求进行定期支原体检测
4. 液氮保存中断超过24小时