一、细胞基本属性
细胞名称：人转移胰腺腺癌细胞吉西他滨耐药株（AsPC-1/GEM）
细胞别称：AsPC-1耐药株；吉西他滨耐药性胰腺癌细胞
种属来源：人（Homo sapiens）
年龄性别：43岁女性（供体原发灶为胰腺腺癌伴腹水转移）
组织来源：胰腺腺癌转移灶（腹水来源）
生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白涂层基质）
细胞形态：不规则多边形，核质比高，耐药株呈现更松散贴壁特性
细胞代数：P5 - P10（维持稳定耐药表型及增殖能力）
细胞规格：1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含专用冻存液）
培养基：RPMI - 1640（含10% FBS+1%青霉素/链霉素+200nM吉西他滨维持耐药性）
培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清细胞冻存液（含10% DMSO及凋亡抑制剂），液氮长期保存
倍增时间：~72 - 96小时（耐药株增殖速率低于亲本细胞）
供应限制：仅限肿瘤耐药机制研究，不可用于药物筛选以外的用途
二、细胞培养操作指南
收货处理：
冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预温培养基
培养瓶：酒精消毒表面，静置4小时后更换新鲜含药培养基
传代标准：细胞融合度达80% - 85%（耐药株贴壁能力减弱需及时传代）
传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
消化方法：
使用0.25%胰酶 - EDTA（含0.02%胶原酶增强消化效率）
37℃消化3 - 5分钟，通过轻拍瓶底辅助细胞脱离
注意事项：
维持培养基中吉西他滨浓度（避免长期培养导致耐药性衰减）
传代后48小时内避免换液以保证细胞贴壁稳定性
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：专用无血清冻存液（含10% DMSO+5%海藻糖）
细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤：
离心后缓慢滴加冻存液，轻柔吹打形成单细胞悬液
程序降温：4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮长期储存
复苏验证：
复苏后72小时检测细胞活力（台盼蓝染色存活率≥85%）
耐药性验证：CCK - 8法测定吉西他滨IC50值（需高于亲本细胞10倍）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 物流温度记录仪显示冻存管经历高于-130℃环境
2. 7天内经qPCR证实支原体污染
3. STR检测显示与ATCC原始株匹配度＜85%
4. 耐药性丢失（IC50值低于标准值20%）
不予重发情形：
1. 未按说明书维持培养基中吉西他滨浓度
2. 使用非指定胶原蛋白涂层培养器皿
3. 擅自进行基因编辑操作影响细胞特性
4. 复苏后培养超过两周未进行耐药性验证
（注：所有操作需遵守II级生物安全实验室规范，耐药基因表达数据随附COA报告）
