一、细胞基本属性
细胞名称:Bel - 7402人肝癌细胞
细胞别称:Bel7402;肝癌细胞系
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:成年男性(原代细胞取自肝细胞癌患者)
组织来源:肝癌组织
生长特性:贴壁生长(需依赖贴壁基质)
细胞形态:上皮样,单层贴壁呈铺路石状排列
细胞代数:P3 - P10(建议使用代数内以保证功能稳定性)
细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:约24 - 48小时(与传代密度及培养条件相关)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基;培养瓶:酒精消毒表面后直接置于培养箱平衡1小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA溶液,37℃消化3 - 5分钟,显微镜下观察细胞间隙增大后终止
注意事项:避免消化过度导致细胞膜损伤;传代后6小时内勿移动培养瓶以减少物理扰动
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及营养保护剂)
细胞密度:冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
冻存步骤:离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液;程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
复苏验证:复苏后48小时内检测细胞存活率(需≥90%);功能验证:CCK - 8检测增殖能力(P5代细胞应保持活性)
四、售后服务承诺
重发标准:1.运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录);2.到货3日内证实支原体污染(需提供检测报告);3.细胞复苏后存活率低于85%(台盼蓝染色法);4.STR鉴定与数据库信息不匹配
不予重发情形:1.未按说明书进行传代或冻存操作;2.使用非推荐培养基或血清导致状态异常;3.收货后超72小时未进行复苏操作;4.实验操作污染导致细胞失活