一、细胞基本属性
- 细胞名称:BT - B人宫颈癌细胞
- 细胞别称:BT - B细胞;宫颈癌细胞系
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:成年女性(源自宫颈癌组织)
- 组织来源:宫颈癌组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖标准培养条件)
- 细胞形态:上皮样,贴壁后呈多边形或铺路石样排列
- 细胞代数:P3 - P10(推荐使用代数以保证功能稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640(含10% FBS + 1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO),液氮长期保存(-196℃)
- 倍增时间:约24 - 48小时(与传代密度及培养状态相关)
- 供应限制:仅用于科学研究,禁止临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒外表面,直接置于37℃培养箱静置4小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:6(推荐密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项
- 避免消化过度(影响细胞膜完整性)
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 消化离心后重悬细胞于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮保存
- 复苏验证
- 复苏后24小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:CCK - 8增殖实验(P5代细胞应保持稳定增殖能力)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 72小时内证实微生物污染(需提供污染检测报告)
- 细胞复苏存活率低于85%(按规范操作验证)
- 细胞STR谱系与数据库不匹配
- 不予重发情形
- 客户未按规程保存或复苏(如延迟复苏超48小时)
- 使用非指定培养基或添加剂导致细胞异常
- 实验操作失误(如反复冻融或污染引入)
- 未留存污染证据即销毁细胞样本