一、细胞基本属性
细胞名称:Capan - 2人胰腺癌细胞
细胞别称:胰腺腺癌细胞;Capan - 2细胞系
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:78岁白人男性(原代取材于胰腺癌组织)
组织来源:胰腺癌原发灶(转移至肝脏的腺癌组织)
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:上皮样,形成紧密单层,细胞边缘清晰
细胞代数:P4 - P15(推荐使用P6 - P10代以保证功能性实验稳定性)
细胞规格:1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含血清替代型冻存液)
培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%丙酮酸钠+10μg/mL胰岛素)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO+海藻糖保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约72 - 96小时(与培养基批次及传代密度相关)
供应限制:仅供基础研究使用,禁止临床应用或商业用途
二、细胞培养操作指南
收货处理:冻存管需37℃水浴解冻,离心去除冻存液后接种于预温培养基;培养瓶运输后静置培养箱4小时再更换培养基
传代标准:融合度达80% - 90%时传代(密度过高易导致细胞分化)
传代比例:1:3至1:5(建议接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA消化液(含0.1%胶原酶),37℃消化3 - 5分钟,离心后完全去除消化酶
注意事项:需添加10mM HEPES缓冲液维持培养基pH稳定性;传代后48小时内避免频繁观察以防影响贴壁
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无动物成分冻存液(含10% DMSO+5%右旋糖酐)
细胞密度:建议冻存浓度5×10⁶ cells/mL(高密度利于复苏后贴壁)
冻存步骤:程序降温:室温→4℃(30min)→ - 80℃(过夜)→液氮储存
复苏验证:复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法);功能验证:CA19 - 9抗原表达检测(需流式细胞术确认);药物敏感性测试:吉西他滨IC50值应符合文献标准
四、售后服务承诺
重发标准:1. 干冰耗尽导致细胞失活(需提供物流温度记录);2. 到货72小时内检测出支原体污染(需第三方检测报告);3. STR分型与ATCC数据库一致性<85%;4. 细胞贴壁率低于70%(需提供接种后24小时明场照片)
不予重发情形:1. 使用非指定培养基导致细胞形态异常;2. 未按规范进行胶原酶辅助消化引发细胞团块;3. 超过建议代数(P15)仍继续传代培养;4. 自行修改培养条件导致增殖速率改变