一、细胞基本属性
- 细胞名称：CCD841 CON人正常结肠上皮细胞
- 细胞别称：CCD841；正常结肠上皮细胞；结肠黏膜上皮细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无胃肠道疾病史）
- 组织来源：结肠黏膜组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：单层铺路石样，接触抑制后呈规则多角形
- 细胞代数：P5 - P10（推荐使用代数以保证功能稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM/F12培养基（含10% FBS + 上皮细胞生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（依赖培养密度与基质包被条件）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加5mL预热培养基混匀离心
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面后静置培养箱1小时平衡
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
- 37℃消化2 - 3分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项
- 消化后轻柔吹打避免损伤微绒毛结构
- 传代后12小时内更换培养基以去除死细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞后重悬于预冷冻存液
- 程序降温：4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后48小时检测细胞贴壁率（应≥85%）
- 功能验证：碱性磷酸酶活性检测（P5代细胞应维持分化特性）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 1. 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供冷链记录）
- 2. 5天内证实微生物污染（需提供第三方检测报告）
- 3. 细胞复苏后贴壁率低于80%（需提供显微图像）
- 4. 细胞STR谱系与数据库不匹配
- 不予重发情形
- 1. 未使用胶原包被培养器皿导致细胞脱落
- 2. 自行修改培养基配方引发功能异常
- 3. 解冻后未及时离心去除冻存保护剂
- 4. 超过推荐代数（P10）后出现的增殖减缓
