一、细胞基本属性
细胞名称
人结直肠腺癌细胞(Human Colorectal Adenocarcinoma Cells)
细胞别称
COLO320 DM;结直肠腺癌细胞系
种属来源
人(Homo sapiens)
组织来源
结直肠腺癌组织
生长特性
贴壁生长(具弱贴壁性,偶见悬浮细胞)
细胞形态
不规则多角形或梭形,核质比高
细胞代数
P15 - P25(经STR鉴定确保遗传稳定性)
细胞规格
1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含血清型冻存液)
培养基
RPMI - 1640(含10% FBS+1%双抗)
培养条件
气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
血清型冻存液(含10% DMSO),-150℃以下长期保存
倍增时间
~24 - 36小时(与培养基成分相关)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床治疗或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬接种
培养瓶:酒精擦拭外壁,静置培养箱平衡1小时
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
传代比例
1:3至1:5(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法
使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项
终止消化时需添加含血清培养基
每周进行支原体检测(建议使用PCR法)
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
完全培养基+10% DMSO
细胞密度
冻存浓度:5×10⁶-1×10⁷ cells/mL
冻存步骤
消化收集对数生长期细胞
梯度降温:4℃ 30min → - 80℃ 24h → 转入液氮
复苏验证
复苏后48小时检测贴壁率(标准≥85%)
功能验证:CCK - 8法检测增殖曲线
四、售后服务承诺
重发标准
1.运输过程温度异常(需提供物流温度记录)
2.到货72小时内证实细菌/真菌污染
3.STR位点匹配率<80%
不予重发情形
1.未按要求使用指定培养基
2.细胞冻存超过6个月未进行复苏检测
3.实验操作污染导致的细胞状态异常
4.未及时传代导致的细胞老化
以上内容均基于COLO320 DM细胞系标准操作流程编制,具体实验方案需根据研究目的优化调整。