一、细胞基本属性
- 细胞名称：GM12878人B淋巴细胞
- 细胞别称：EBV转化B淋巴细胞系；淋巴母细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康女性供体（无遗传病及免疫缺陷史）
- 组织来源：外周血B淋巴细胞经EB病毒转化建系
- 生长特性：悬浮聚团生长（无需贴壁基质）
- 细胞形态：圆形或类圆形，透亮胞质，聚集成葡萄串状
- 细胞代数：P10 - P25（保持基因组稳定性及增殖活性）
- 细胞规格：1×10⁶ cells/T25悬浮培养瓶或1mL冻存管（含10% DMSO冻存液）
- 培养基：RPMI 1640培养基（含15% FBS+2mM L - 谷氨酰胺+1%丙酮酸钠）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：程序降温后液氮长期保存（冻存液含10% DMSO+90% FBS）
- 倍增时间：约24 - 36小时（视细胞密度与代谢状态）
- 供应限制：仅限基础研究，不可用于临床治疗或基因编辑衍生品开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：直接转移至培养箱静置，避免剧烈震荡
- 传代标准：细胞密度达1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL（每2 - 3天传代）
- 传代比例：1:3至1:5（按密度稀释至5×10⁵ cells/mL起始）
- 操作方法：
- 直接离心（200g×5min）收集细胞，无需酶消化
- 重悬时轻柔吹打避免细胞团机械损伤
- 注意事项：
- 定期检测支原体（推荐每3个月PCR筛查）
- 维持培养基pH 7.2 - 7.4，高密度时及时分瓶防酸化
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：FBS基础冻存液（含10% DMSO+双抗）
- 细胞密度：冻存浓度5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，缓慢滴加冻存液混匀
- 分装至冻存管后转移至程序降温盒（-1℃/min）
- 降温完成后浸入液氮保存
- 复苏验证：
- 存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能性验证：表面标志物CD19/CD20流式检测（阳性率＞95%）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 物流温度＞-130℃超12小时（需提供温度记录）
- 到货7日内证实支原体污染（需第三方检测报告）
- 复苏存活率＜90%（附台盼蓝染色图像）
- STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形：
- 未使用指定培养基导致增殖异常
- 长期过度传代（＞P30）引发基因组变异
- 实验污染后未灭菌直接丢弃培养器具
- 擅自改造细胞（如基因转染）后功能丧失
所有操作需符合生物安全二级（BSL - 2）标准，废弃物需121℃高压灭菌处理。
