一、细胞基本属性
本产品为人永生化表皮细胞株HACAT的荧光素酶(Luciferase, LUC)标记版本,通过基因工程手段稳定表达荧光素酶基因,适用于活体成像、药物筛选及细胞迁移/增殖动态监测。细胞别称为HACAT - LUC或荧光素酶标记表皮细胞,种属来源为人(Homo sapiens),原始细胞系经永生化处理,来源于健康成人表皮组织,供体筛选无皮肤病或遗传疾病史。细胞生长特性为贴壁型,需依赖细胞外基质成分贴附,形态呈典型多角形,接触抑制后形成单层结构。推荐使用代数为P15 - P25,以保证荧光素酶活性及增殖稳定性。细胞规格为1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液),基础培养基为DMEM高糖型(含10% FBS及1%双抗),培养条件为5% CO₂、37℃恒温环境。冻存采用无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),长期保存需置于液氮环境(-150℃以下)。细胞倍增时间约为24 - 36小时,荧光素酶信号稳定性经连续传代验证,发光效率波动率低于5%。本产品仅限科研用途,禁止用于临床或动物实验。
二、细胞培养操作指南
收到细胞后,冻存管需37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀离心,弃上清后重悬接种;若为培养瓶,需酒精擦拭外壁并静置于培养箱平衡1小时。传代标准为细胞融合度达80% - 90%,建议每2 - 3天传代一次,传代比例为1:4至1:6,接种密度不低于1×10^4 cells/cm²。消化时使用0.25%胰酶 - EDTA溶液,37℃孵育2 - 3分钟,镜下观察细胞间隙增大后立即加入含血清培养基终止消化。需注意避免消化过度导致荧光素酶活性丢失,传代后6小时内建议更换培养基以去除残留酶类。荧光素酶活性检测前需确保细胞处于对数生长期,避免高密度导致的信号衰减。
三、细胞冻存操作规范
冻存液采用无血清配方(含10% DMSO及糖原保护剂),冻存密度为5×10^5至1×10^6 cells/mL。冻存步骤包括离心收集细胞、缓慢逐滴加入冻存液、分装至冻存管后梯度降温(4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期储存)。复苏后需通过荧光素酶活性检测验证细胞功能,建议使用Bright - Glo™ Luciferase检测系统,信号强度应不低于冻存前基准值的90%。若需长期实验,建议每3个月复苏验证一次活性稳定性。
四、售后服务承诺
符合以下情形可申请重发:1.运输过程干冰耗尽导致细胞死亡(需提供物流温度记录及冻存管破裂证据);2.到货72小时内经qPCR证实支原体污染;3.荧光素酶活性检测值低于说明书标定值的80%(需提供原始检测数据及实验流程);4.STR鉴定结果与数据库存档不匹配。不予重发情形包括:1.未按说明书使用指定培养基导致信号丢失;2.自行进行基因编辑或药物筛选导致功能异常;3.冻存管反复冻融超过2次;4.未在收货后48小时内反馈问题。技术支持涵盖荧光素酶检测方案优化及成像参数指导,响应时间为工作日24小时内。
注:本产品需配合荧光素底物(如D - Luciferin)使用,具体实验方案可联系技术支持获取。