一、细胞基本属性
- 细胞名称：HBL - 100人整合SV40基因的乳腺上皮细胞
- 细胞别称：HBL - 100；SV40永生化乳腺上皮细胞；乳腺上皮细胞系
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：成年女性（供体筛选无乳腺疾病史）
- 组织来源：乳腺组织上皮层
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被）
- 细胞形态：单层铺路石样或多角形，融合后呈现典型上皮细胞镶嵌排列
- 细胞代数：P5 - P10（SV40永生化特性确保高增殖稳定性）
- 细胞规格：5×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM/F12培养基（含10% FBS+表皮生长因子+胰岛素+氢化可的松）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 36小时（高增殖活性，依赖血清浓度与细胞密度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或转基因生物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置于培养箱平衡1小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（推荐每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:6（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺缓冲液）
- 37℃消化3 - 5分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项：
- 避免消化不足（易导致细胞成团脱落）
- 传代后12小时更换培养基以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化离心后重悬于冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后12小时台盼蓝染色检测存活率（≥90%为合格）
- 功能验证：SV40 Large T抗原表达检测（免疫荧光法）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程中干冰耗尽导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 收到后48小时内证实支原体污染（需提供第三方检测报告）
- 复苏存活率低于85%（需提供台盼蓝染色图像）
- STR分型与数据库记录不符
- 不予重发情形：
- 未按说明书要求进行胶原包被导致贴壁失败
- 使用非推荐生长因子或血清浓度引发异常增殖
- 未定期检测SV40基因表达导致功能丧失
- 液氮保存设备故障导致反复冻融
（注：本产品需在生物安全二级实验室操作，建议定期进行核型分析及致瘤性评估。）
