一、细胞基本属性
- 细胞名称：HCMEC/D3永生化人脑微血管内皮细胞（Immortalized Human Cerebral Microvascular Endothelial Cells）
- 细胞别称：HCMEC/D3；脑微血管内皮细胞；血脑屏障内皮细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体无神经系统疾病史）
- 组织来源：脑组织微血管段（经永生化处理，保留内皮细胞特性）
- 生长特性：贴壁生长（需包被胶原或纤维连接蛋白基质）
- 细胞形态：单层铺路石样排列，接触抑制后呈扁平多角形
- 细胞代数：P10 - P20（永生化细胞系，遗传稳定且增殖能力可控）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Endothelial Cell Medium（含5% FBS+内皮细胞特异性生长因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~48 - 60小时（依赖基质包被与生长因子浓度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每3 - 4天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02%胶原酶）
- 37℃消化2 - 3分钟，细胞边缘卷曲时立即终止
- 注意事项：
- 避免机械刮取（保护紧密连接蛋白完整性）
- 首次传代后48小时更换培养基以促进屏障功能重建
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1.5×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心后重悬于预冷冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30分钟 → - 80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时检测细胞活力（台盼蓝拒染率≥90%）
- 功能验证：跨内皮电阻（TEER）检测（P10代细胞应维持屏障特性）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程中温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度监控证明）
- 5日内证实支原体污染（需提供第三方检测报告）
- 细胞复苏活力低于85%（经台盼蓝染色复检确认）
- STR图谱与数据库标准不一致
- 不予重发情形：
- 收货后超72小时未按规范复苏
- 使用非推荐基质包被导致细胞贴壁失败
- 未定期检测屏障功能导致实验数据异常
- 自行改造细胞后引发的功能缺陷
（本产品适用于血脑屏障机制、药物递送及神经血管研究，需严格遵守生物安全操作规范）
