一、细胞基本属性
- 细胞名称：HCT116人结肠癌细胞
- 细胞别称：HCT - 116；结肠腺癌细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 组织来源：结肠癌组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质及血清环境）
- 细胞形态：上皮样，单层贴壁，增殖期呈不规则多角形
- 细胞代数：P3 - P15（建议使用代数内保证遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：McCoy's 5A培养基（含10% FBS+1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 36小时（依赖传代密度及培养条件）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基，接种至培养瓶。
- 培养瓶：酒精擦拭外壁，静置培养箱4小时恢复贴壁后换液。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）。
- 传代比例：1:3至1:6（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）。
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含酚红指示）。
- 37℃消化2 - 3分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落，加含血清培养基终止消化。
- 注意事项
- 避免消化过度导致细胞膜损伤。
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶，确保贴壁稳定性。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+90% FBS）。
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤
- 离心收集细胞，重悬于冻存液，分装至冻存管。
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存。
- 复苏验证
- 复苏存活率≥90%（台盼蓝染色法）。
- 功能验证：细胞增殖曲线检测（P5代细胞应保持对数生长期活性）。
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）。
- 到货3天内证实微生物污染（需提供检测报告）。
- 复苏后存活率低于90%（需提供台盼蓝染色结果）。
- STR分型与数据库不匹配。
- 不予重发情形
- 未按规范解冻或延迟复苏超过48小时。
- 使用非推荐培养基或血清导致细胞状态异常。
- 不当操作导致支原体污染（未定期检测）。
- 实验设计问题（如药物浓度过高）导致的细胞损伤。
