一、细胞基本属性
细胞名称:HEC-1 - B人子宫膜腺癌细胞
细胞别称:HEC-1 - B;子宫内膜腺癌细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:成年女性(供体信息保密,已通过伦理审查)
组织来源:子宫内膜腺癌组织
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:上皮样,单层贴壁,胞质丰富,核质比中等
细胞代数:P3 - P10(建议使用代数范围以保证遗传稳定性)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:DMEM/F12(含10% FBS+1%双抗+0.01mg/mL胰岛素)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:程序降温冻存液(含DMSO及糖原保护剂),液氮长期保存
倍增时间:~36 - 48小时(受血清浓度及传代密度影响)
供应限制:仅限科学研究,禁止临床治疗或生物医药原料生产
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴解冻后,转移至含5mL培养基的离心管,1000rpm离心3分钟
- 培养瓶:酒精消毒表面后直接置于CO₂培养箱平衡4小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.1%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
- 避免消化时间过长导致细胞膜损伤
- 传代后需补充2mM谷氨酰胺维持细胞代谢活性
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO+20% FBS+渗透压调节剂)
细胞密度:冻存浓度:5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
冻存步骤:
- 预冷冻存管至4℃,细胞悬液分装后密封
- 梯度降温程序:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃ 12h → 液氮储存
复苏验证:
- 复苏后48小时进行细胞活力检测(要求存活率≥85%)
- 功能验证:CCK - 8增殖曲线测定(P5代细胞应保持对数生长期特性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度记录异常导致细胞失活(需提供温度记录仪数据)
2. 收到后72小时内证实真菌/支原体污染(需第三方检测报告)
3. 细胞贴壁率低于80%(需提供显微成像记录)
4. STR分型与ATCC标准数据库不匹配
不予重发情形:
1. 未使用指定胶原蛋白包被培养器皿
2. 擅自更改培养基配方导致细胞分化
3. 未定期进行支原体预防性处理
4. 超过建议代数(P10)仍进行实验