一、细胞基本属性
- 细胞名称：人红白细胞白血病细胞（Human Erythroleukemia Cells）
- 细胞别称：HEL细胞；人红白血病细胞；红系白血病细胞系
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 疾病背景：源自34岁男性红白血病患者外周血，具有红系与粒系分化潜能
- 组织来源：外周血单核细胞层（经EB病毒永生化处理）
- 生长特性：悬浮与贴壁混合生长（部分细胞聚集成团）
- 细胞形态：圆形或类圆形，贴壁亚群可呈短梭形，核质比高
- 细胞代数：P5 - P15（推荐使用代数以确保遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含血清冻存液）
- 培养基：RPMI 1640+10% FBS+1%双抗（可添加0.05mM β - 巯基乙醇）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：含血清冻存液（10% DMSO+90%培养基），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 36小时（与细胞密度及培养基成分相关）
- 供应限制：仅限体外研究，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴轻柔摇动解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：显微镜观察后转移至15mL离心管，1200rpm离心5分钟
- 传代标准：悬浮细胞密度达1×10⁶ cells/mL或贴壁细胞融合度＞80%
- 传代方法：
- 悬浮细胞：直接稀释传代（维持密度2×10⁵ - 5×10⁵ cells/mL）
- 贴壁细胞：0.25%胰酶消化2 - 3分钟，离心收集
- 注意事项：
- 定期检测支原体（建议每3个月一次）
- 避免频繁离心（减少细胞机械损伤）
- 贴壁亚群需使用细胞刮刀轻柔收集
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：培养基+20% FBS+10% DMSO（现用现配）
- 冻存密度：5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL（高密度冻存提升复苏率）
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，重悬于预冷冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证：
- 存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：血红蛋白诱导分化实验（72h内CD235a表达升高＞30%）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 干冰运输失效导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 到货48小时内证实细菌/真菌污染（需提供显微图像）
- 细胞STR谱系与ATCC数据不符
- 复苏存活率＜85%（需提供染色视频）
- 不予重发情形：
- 使用无血清培养基导致细胞凋亡
- 未按规范进行离心（转速＞1500rpm或时间＞10分钟）
- 未定期检测支原体导致实验室污染扩散
- 诱导分化后细胞未按生物危害品处理
