一、细胞基本属性
- 细胞名称:Chang Liver人宫颈癌细胞
- 细胞别称:Chang Liver;人肝细胞癌细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无肝病及宫颈疾病史)
- 组织来源:肝脏组织(经转化后具备宫颈癌细胞特性)
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:上皮样单层,高密度时呈梭形或多角形
- 细胞代数:P5 - P10(推荐使用代数以保证增殖稳定性)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含胎牛血清冻存液)
- 培养基:MEM培养基(含10% FBS+1%非必需氨基酸+1%丙酮酸钠)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:含血清冻存液(含10% DMSO),液氮长期保存
- 倍增时间:约24 - 36小时(与培养基批次及接种密度相关)
- 供应限制:仅用于基础科研,禁止临床治疗或生物医药开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管需37℃水浴震荡解冻,加入5mL预热培养基离心重悬
- 培养瓶经紫外线表面灭菌后静置培养箱4小时适应
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
- 传代比例:1:3至1:5(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含酚红指示剂)
- 37℃消化3 - 5分钟,离心后完全去除消化液
- 注意事项:
- 需定期检测支原体(建议每传3代检测一次)
- 换液时保留三分之一原培养基维持代谢平衡
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:胎牛血清冻存液(含20% FBS+10% DMSO)
- 细胞密度:冻存浓度5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤:
- 对数生长期细胞经0.4%台盼蓝筛选后重悬
- 程序降温:4℃ 1h → - 80℃ 24h → 液氮长期储存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时观察贴壁率(需>85%)
- 功能验证:CCK - 8法检测增殖曲线应符合标准斜率
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 液氮运输罐真空失效导致细胞失活(需提供温度记录仪数据)
- 到货7日内经流式细胞术检测凋亡率>30%
- 细胞STR分型与ATCC数据库偏离>3个位点
- 不予重发情形:
- 超低温保存超过12个月未复苏
- 自行改用无血清培养体系导致分化异常
- 未使用原代配套培养基进行传代
- 未定期进行染色体核型分析