一、细胞基本属性
- 细胞名称:HK - 2人肾皮质近曲小管上皮细胞
- 细胞别称:HK - 2细胞;人肾近曲小管上皮细胞;肾小管上皮细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无肾脏疾病史)
- 组织来源:肾皮质近曲小管段
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质贴附)
- 细胞形态:典型上皮样单层,融合后呈多角形或鹅卵石样排列
- 细胞代数:P3 - P8(确保功能稳定性与遗传一致性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:专用上皮细胞培养基(含5% FBS+表皮生长因子及肾小管上皮细胞添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~48 - 72小时(依赖培养密度与培养基条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加5mL预热培养基轻柔混匀。
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面后静置于培养箱2小时平衡。
- 传代标准:细胞融合度达80%-90%(通常每3 - 4天传代一次)。
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)。
- 消化方法
- 使用试剂:0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)。
- 操作过程:37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止消化。
- 注意事项
- 避免消化过度(防止细胞间紧密连接损伤)。
- 传代后12 - 24小时内更换培养基以去除残留酶类。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂)。
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶-2×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤
- 离心收集细胞,轻柔重悬于冻存液。
- 梯度降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存。
- 复苏验证
- 复苏后24小时内台盼蓝染色检测存活率(≥90%为合格)。
- 功能验证:碱性磷酸酶活性检测(P5代细胞应维持肾小管上皮特性)。
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程中干冰耗尽导致细胞失活(需提供物流温度记录)。
- 3天内证实微生物污染(需提供污染检测报告)。
- 复苏后细胞存活率低于90%(台盼蓝染色法)。
- STR鉴定结果与存档数据不符。
- 不予重发情形
- 收货后未按规范在72小时内复苏细胞。
- 使用非推荐培养基或添加剂导致细胞功能异常。
- 反复冻融或不当操作导致细胞损伤。
- 未定期检测支原体即进行后续实验。
备注:本产品需由专业人员操作,详细实验方案可联系技术支持获取。