一、细胞基本属性
细胞名称：人骨肉瘤细胞（Human Osteosarcoma Cells）
细胞别称：HOS细胞；骨肉瘤细胞系
种属来源：人（Homo sapiens）
年龄性别：源自13岁女性骨肉瘤患者
组织来源：胫骨原发肿瘤组织
生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质贴附）
细胞形态：不规则梭形或长纤维状，部分呈多角形聚集
细胞代数：P5 - P15（推荐使用代数内保证增殖活性）
细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含血清冻存液）
培养基：MEM培养基（含10% FBS+1%双抗）
培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：含血清冻存液（10% DMSO+90% FBS），-150℃以下长期保存
倍增时间：~24 - 36小时（受培养基批次及密度影响）
供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒外表面，静置培养箱4小时后再观察
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落，显微镜下确认分离状态
注意事项：
- 消化终止需加入2倍体积含血清培养基
- 避免频繁传代导致细胞分化（建议每代冻存备份）
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：含血清冻存液（10% DMSO+90% FBS）
细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤：
- 消化后离心收集细胞，轻柔重悬于预冷冻存液
- 梯度降温：4℃ 30min → -80℃ 24h → 转入液氮长期保存
复苏验证：
- 复苏后48小时内检测贴壁率（需≥80%）
- 功能验证：CCK - 8法检测增殖曲线（P8代细胞应维持对数生长期特性）
四、售后服务承诺
重发标准：
- 运输中温度记录仪显示超温（需提供物流温度曲线）
- 到货72小时内证实支原体污染（需第三方检测报告）
- 细胞复苏贴壁率低于70%（需提供显微照片）
- STR分型与数据库记录不符
不予重发情形：
- 未按说明书进行离心去冻存液操作
- 使用低血清（<5%）或无血清培养基培养
- 超过推荐代数（P15）仍要求质控达标
- 未在生物安全柜内操作导致污染
（注：所有操作需符合生物安全二级实验室规范，细胞特性可能随传代次数发生表型漂移，建议定期进行STR鉴定）
