一、细胞基本属性
- 细胞名称：HPAF - II人胰腺癌细胞（Human Pancreatic Adenocarcinoma Cell Line HPAF - II）
- 细胞别称：HPAF - II；胰腺导管癌细胞；胰腺腺癌细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：47岁女性（原代细胞取自胰腺导管腺癌伴肝转移患者）
- 组织来源：胰腺导管腺癌组织（转移至肝脏的恶性病灶）
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被的基质表面）
- 细胞形态：上皮样细胞，单层铺路石样排列，核质比高，可见伪足延伸
- 细胞代数：P5 - P10代（推荐使用代数内维持基因组稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T75培养瓶 或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：McCOY's 5A培养基（含10% FBS+1%青霉素 - 链霉素+10mM HEPES缓冲液）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞膜保护剂），-150℃以下液氮长期保存
- 倍增时间：~50 - 60小时（受培养基批次及传代密度影响）
- 供应限制：仅限科学研究，禁止临床治疗、药物开发或生物医药商业用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管接收后需立即37℃水浴快速解冻，加入预热培养基轻柔混匀离心去除冻存液；培养瓶收货时需酒精消毒表面，静置于培养箱4小时恢复代谢。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（贴壁紧密时需及时传代，避免过度生长导致分化）
- 传代比例：1:3至1:4（建议接种密度为3×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：使用0.25%胰酶 - EDTA溶液，37℃消化3 - 5分钟，显微镜下观察细胞间隙增大后迅速终止反应。
- 注意事项：避免消化液残留影响细胞贴壁，传代后6小时内勿移动培养瓶；建议使用胶原蛋白或纤连蛋白包被培养器皿以增强贴附效率。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO、40%基础培养基及50%胎牛血清）
- 冻存密度：1×10^6 cells/mL至2×10^6 cells/mL（高密度冻存可降低复苏损伤）
- 冻存步骤：离心收集对数生长期细胞，冻存液重悬后分装至冻存管，按程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期存储。
- 复苏验证：复苏后48小时内检测细胞活性（台盼蓝染色存活率≥85%），并通过CCK - 8法验证增殖能力（P5代细胞应保持对数生长曲线）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 物流温控异常导致细胞死亡（需提供运输温度记录及冻存管状态图）
- 到货72小时内经qPCR证实支原体污染
- STR基因分型与数据库（ATCC/DSMZ）不符
- 复苏后贴壁率低于70%（需提供明场及荧光染色证据）
- 不予重发情形：
- 客户未按规范进行胶原包被导致贴壁失败
- 使用非指定培养基或血清引发细胞形态异常
- 擅自进行基因编辑后导致的功能缺失
- 未定期检测支原体造成实验室交叉污染
