一、细胞基本属性
- 细胞名称:HT - 1080人纤维肉瘤细胞(Human Fibrosarcoma Cells)
- 细胞别称:HT1080;纤维肉瘤细胞;人纤维肉瘤细胞系
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 组织来源:纤维肉瘤组织(取自患者原发肿瘤)
- 生长特性:贴壁生长(依赖贴壁基质,无接触抑制)
- 细胞形态:不规则纺锤形或多边形,贴壁后呈松散网状排列
- 细胞代数:P3 - P10(建议使用中低代数以维持遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:EMEM培养基(含10% FBS + 1%非必需氨基酸+ 1%丙酮酸钠)
- 培养条件:气相:5% CO₂+ 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),- 150℃以下长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(依赖培养密度及血清浓度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精表面消毒,静置培养箱4小时后再换液
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞间隙增大后终止
- 注意事项:
- 避免消化时间过长(易导致细胞膜损伤)
- 传代后6小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶- 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30min → - 20℃ 2h → - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(保证≥90%)
- 功能验证:细胞增殖能力检测(P5代细胞应维持稳定增殖速率)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 收到后72小时内证实微生物污染(需提供污染检测结果)
- 细胞复苏存活率低于90%(台盼蓝染色法)
- STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形:
- 未按推荐培养基培养导致细胞状态异常
- 收货后超过72小时未进行复苏操作
- 自行反复冻融导致细胞损伤
- 未按要求进行细胞身份验证即开展实验
注:所有操作需遵守生物安全规范,实验废弃物需按生物危害物处理。