iPS人诱导多能干细胞

人细胞系

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XM-X08871×10^6人细胞系4000


一、细胞基本属性

细胞名称:人诱导多能干细胞(Human Induced Pluripotent Stem Cells)

细胞别称:hiPSCs;iPS细胞;诱导多能干细胞

种属来源:人(Homo sapiens)

重编程来源:健康成人成纤维细胞(经转录因子重编程)

组织来源:皮肤成纤维细胞或其他体细胞(经体外重编程)

生长特性:贴壁生长(依赖基质胶或饲养层细胞),形成致密克隆

细胞形态:典型多能干细胞克隆形态,边缘光滑,核质比高

细胞代数:P3 - P10(经严格质控确保多能性及核型稳定)

细胞规格:1×10^6 cells/冻存管(含无血清冻存液)或T25培养瓶(活细胞)

培养基:专用无血清培养基(含bFGF、TGF - β等维持多能性因子)

培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%

冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存(-196℃)

多能性标志物:OCT4、SOX2、NANOG阳性(免疫荧光/流式验证)

供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗、药物筛选或异种移植


二、细胞培养操作指南

收货处理:

 - 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入预温培养基离心去冻存液后重悬接种

 - 培养瓶:酒精消毒表面,静置培养箱1小时平衡后换液

传代标准:克隆融合度达80% - 90%(通常每5 - 7天传代一次)

传代比例:1:3至1:6(根据克隆密度调整,建议接种密度1×10^4 cells/cm²)

消化方法:

 - 使用0.5 mM EDTA或温和消化酶(如Accutase)

 - 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落,立即中和消化液

注意事项:

 - 传代后添加ROCK抑制剂(Y - 27632)提升贴壁存活率

 - 每日观察克隆形态,避免分化(边缘松散或扁平化需及时处理)

 - 培养基每日更换,维持pH 7.2 - 7.4


三、细胞冻存操作规范

冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+30%培养基+60%基础培养液)

细胞密度:冻存浓度:1×10^6 - 2×10^6 cells/mL(高密度提升复苏效率)

冻存步骤:

 - 消化收集细胞,离心后重悬于冻存液

 - 程序降温:4℃ 30分钟→-80℃ 24小时→转移至液氮长期保存

复苏验证:

 - 复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥85%)

 - 多能性验证:拟胚体形成实验或三胚层分化潜能检测


四、售后服务承诺

重发标准:

1. 运输过程液氮罐泄漏或温度记录异常(需提供物流凭证)

2. 到货72小时内检测出支原体污染(需提供第三方检测报告)

3. 细胞复苏后多能性标志物表达缺失(需提供免疫荧光原始数据)

4. STR分型与产品描述不一致

不予重发情形:

1. 未使用推荐基质胶或饲养层导致细胞分化

2. 未按时换液或培养基过期引发细胞状态异常

3. 自行更改培养条件(如CO₂浓度、温度偏离标准)

4. 未进行定期核型分析导致遗传异常未被及时发现