一、细胞基本属性
1. 细胞名称:人套细胞淋巴瘤细胞(Human Mantle Cell Lymphoma Cells)
2. 细胞别称:Jeko - 1;套细胞淋巴瘤细胞;MCL细胞系
3. 种属来源:人(Homo sapiens)
4. 年龄性别:成年男性(供体诊断为套细胞淋巴瘤)
5. 组织来源:外周血单核细胞(经EB病毒转化)
6. 生长特性:悬浮生长(聚集成团或单细胞状态)
7. 细胞形态:圆形或类圆形,胞体透亮,核质比高
8. 细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数以保证增殖稳定性)
9. 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
10. 培养基:RPMI 1640培养基(含10% FBS+1%青霉素 - 链霉素)
11. 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
12. 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
13. 倍增时间:~24 - 48小时(依赖培养密度与营养条件)
14. 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或药物商业化生产
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:直接置于培养箱平衡30分钟后更换新鲜培养基
2. 传代标准:细胞密度达1×10^6 - 2×10^6 cells/mL(建议每2 - 3天传代)
3. 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度2×10^5 cells/mL)
4. 传代方法
- 离心收集细胞(150×g,5分钟)后重悬于新鲜培养基
- 无需酶消化,直接按比例稀释接种
5. 注意事项
- 定期检测支原体污染(建议每两周进行PCR检测)
- 避免剧烈吹打导致细胞团物理损伤
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
2. 细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
3. 冻存步骤
- 离心收集细胞后缓慢滴加冻存液混匀
- 梯度降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期储存
4. 复苏验证
- 复苏后48小时台盼蓝染色检测存活率(标准≥85%)
- 功能验证:CCK - 8增殖曲线检测(P10代内应保持对数生长期特性)
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 1.液氮运输罐温度记录异常(需提供物流温度监控数据)
- 2.到货72小时内证实交叉污染(需提供STR鉴定报告)
- 3.细胞复苏存活率低于80%(需提供台盼蓝染色视频记录)
- 4.细胞特异性标志物CD5/CD20表达缺失(需提供流式检测数据)
2. 不予重发情形
- 1.未使用指定培养基导致细胞增殖停滞
- 2.长时间超密度培养引发细胞凋亡
- 3.实验操作污染未及时反馈(超过7个工作日)
- 4.未按规范进行细胞计数即进行实验
(注:本产品需配合配套培养试剂盒使用,操作前请详细阅读技术手册,实验人员需具备II级生物安全实验室操作资质)