一、细胞基本属性
- 细胞名称：K562/ADR人白血病耐药细胞株
- 细胞别称：K562/ADM；K562/Dox；耐阿霉素髓系白血病细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 疾病背景：慢性髓系白血病（Chronic Myelogenous Leukemia）耐药亚型
- 组织来源：骨髓（经阿霉素长期诱导筛选获得多药耐药表型）
- 生长特性：悬浮生长（聚集成团或单细胞分散）
- 细胞形态：圆形或类圆形，透光性强，折光性明显
- 细胞代数：P5 - P15（建议使用代数内维持耐药性稳定）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含血清型冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640（含10% FBS+1%双抗+0.1μg/mL阿霉素维持浓度）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：程序降温冻存液（含10% DMSO），-150℃以下长期保存
- 耐药特性：对阿霉素耐药性显著（IC50较亲本细胞提高50倍以上）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：静置培养箱平衡30分钟后轻柔吹散细胞团
- 传代标准：细胞密度达1×10^6 cells/mL（通常每2 - 3天传代）
- 传代比例：1:3至1:4（建议维持密度0.5×10^6 - 1×10^6 cells/mL）
- 操作要点
- 离心速度：200g×5分钟（避免高速离心损伤细胞膜）
- 换液时保留适量旧培养基以维持耐药表型
- 注意事项
- 定期检测阿霉素浓度（避免耐药性丢失）
- 培养体系需严格无菌（悬浮细胞易受微生物污染）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：完全培养基+10% DMSO（现用现配）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10^6 cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞，重悬于冻存液后分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 耐药性验证：CCK - 8法检测阿霉素半数抑制浓度（IC50需≥5μM）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 物流温度记录异常导致细胞失活（需提供运输温度曲线）
- 到货72小时内证实微生物污染（需提供污染检测证据）
- 复苏存活率低于90%（需提供台盼蓝染色原始图片）
- STR分型与数据库记录不符
- 不予重发情形
- 未按时传代导致细胞密度过高坏死
- 擅自降低阿霉素浓度致耐药性丢失
- 未按程序冻存导致细胞反复冻融
- 未进行常规支原体检测直接扩增使用
