一、细胞基本属性
- 细胞名称:KG - 1a人急性髓性白血病细胞
- 细胞别称:KG - 1a细胞;急性髓系白血病细胞
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:59岁男性(原代取自急性髓性白血病患者外周血)
- 组织来源:外周血(经Ficoll密度梯度离心分离)
- 生长特性:悬浮生长(部分细胞可轻微贴壁,形成疏松聚集体)
- 细胞形态:圆形或类圆形,胞体透亮,核质比高
- 细胞代数:P5 - P15(建议使用前10代以保证遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:IMDM培养基(含20%胎牛血清 + 1%青霉素/链霉素)
- 培养条件:气相:5% CO₂+ 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
- 倍增时间:~48 - 60小时(依赖细胞密度与传代频率)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或转基因生物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精表面消毒,直接转移至培养箱静置培养
- 传代标准:细胞密度达1×10^6 - 2×10^6 cells/mL(通常每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:4(推荐初始密度2×10^5 cells/mL)
- 收集方法:
- 离心收集细胞悬液(1000rpm,5分钟)
- 直接分装至新鲜培养基(无需酶消化)
- 注意事项:
- 避免长时间高密度培养(易诱发分化)
- 定期检测支原体污染(推荐每2代进行一次PCR检测)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及营养保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10^6 - 2×10^6 cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30min → - 20℃ 2h → - 80℃过夜 → 液氮长期储存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时台盼蓝染色检测存活率(保证≥90%)
- 功能验证:CD34/CD117表面标志物流式检测(P8代细胞阳性率应>95%)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度追踪报告)
- 到货72小时内证实细菌/真菌污染(需提供染色镜检证据)
- 复苏后存活率低于85%(需提供台盼蓝染色图片)
- STR分型与数据库记录不符
- 不予重发情形:
- 客户未在48小时内完成复苏操作
- 使用含低于15%血清的培养基导致增殖停滞
- 未按规范进行离心操作引发机械损伤
- 未执行建议的支原体检测流程