一、细胞基本属性
- 细胞名称:KNS - 89人脑胶质细胞瘤细胞
- 细胞别称:KNS - 89细胞;胶质瘤细胞系
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 组织来源:脑胶质瘤组织(经病理学确诊)
- 生长特性:贴壁生长(需预包被培养器皿)
- 细胞形态:不规则梭形或多形性,核质比高,可见伪足延伸
- 细胞代数:P5 - P15(建议控制代次以维持基因组稳定性)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含8% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 增殖特性:倍增时间约36 - 48小时(受培养基批次影响)
- 供应限制:仅限于肿瘤机制研究,禁止临床应用或转基因操作
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒后静置培养箱4小时再换液
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项:
- 严格控制消化时间(过度消化导致细胞团块)
- 传代后12小时需补加新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO+20% FBS)
- 冻存密度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存流程:
- 消化离心后缓慢加入预冷冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存
- 质控标准:
- 复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:CCK - 8检测P10代细胞需保持增殖活性
四、售后服务承诺
- 重发条款:
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 到货48小时内证实微生物污染(需提供检测报告)
- STR分型与数据库不匹配
- 复苏存活率低于承诺标准
- 免责声明:
- 客户未按手册进行传代导致的形态异常
- 使用非指定培养基引起的功能衰减
- 液氮保存设备故障导致的细胞失活
- 超过建议代次(P15)后出现的遗传漂移