一、细胞基本属性
细胞名称:kyse30人食道癌细胞
细胞别称:食管鳞癌细胞系kyse30
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:成年男性食管癌组织
组织来源:食管中段鳞状细胞癌组织
生长特性:贴壁生长(具有侵袭性增殖特征)
细胞形态:不规则多边形,核质比高,可见伪足延伸
细胞代数:P15 - P25(经STR鉴定确认遗传稳定性)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:恒温37℃、5% CO₂、饱和湿度环境
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO),液氮长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(与传代密度相关)
供应限制:仅限于肿瘤机制研究,禁止体内移植实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速复苏,离心后重悬接种
- 培养瓶:直接静置培养箱平衡4小时
传代标准:
- 融合度达80% - 90%(建议3天传代周期)
- 密度过载易导致细胞空泡化
传代比例:
- 推荐1:3至1:5分瓶(接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 室温消化2 - 3分钟至细胞间隙增大
注意事项:
- 消化终止需添加含血清培养基
- 保持传代间隔不超过5天
- 定期检测支原体污染
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:基础培养基+20% FBS+10% DMSO
细胞密度:5×10^6 cells/mL(高浓度冻存)
冻存步骤:
- 对数生长期收集细胞
- 梯度降温程序:4℃→ - 20℃→ - 80℃→液氮
质量检测:
- 复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 传代三代内维持稳定增殖速率
- 定期STR位点比对验证
四、售后服务承诺
质保范围:
1. 到货干冰完全挥发导致的细胞失活
2. 72小时内检测到微生物污染
3. 复苏存活率低于承诺标准
4. STR鉴定存在位点偏差
免责条款:
1. 收货后未及时规范复苏
2. 自行更换培养基配方
3. 未按要求进行定期传代
4. 实验操作污染导致细胞变异
技术支持:
提供专业文献引用指南、培养问题实时咨询、定期发送细胞状态提醒通知