一、细胞基本属性
- 细胞名称：KYSE150人食管鳞癌细胞
- 细胞别称：KYSE - 150；食管鳞癌细胞系
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 组织来源：食管鳞状细胞癌组织
- 生长特性：贴壁生长（需经胰酶消化传代）
- 细胞形态：上皮样，单层贴壁呈铺路石样排列
- 细胞代数：P3 - P8（推荐使用代数，保证遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640培养基（含10% FBS+1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约24 - 48小时（依赖培养密度与血清浓度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精擦拭外表面，静置培养箱4小时待细胞贴壁
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 37℃消化2 - 3分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项：
- 避免消化过度导致细胞膜损伤
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及血清替代物）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化离心后重悬于冻存液，分装至冻存管
- 梯度降温：4℃ 30分钟 → -80℃过夜 →液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后存活率≥85%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：CCK - 8检测增殖活性（P5代细胞增殖曲线应符合标准）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供冻存管状态证明）
- 72小时内证实支原体/真菌污染（需提供第三方检测报告）
- 细胞复苏存活率低于85%（需提供染色检测视频）
- STR分型与数据库记录不符
- 不予重发情形：
- 收货后超72小时未进行复苏操作
- 使用非推荐培养基或血清导致细胞异常
- 未按规范进行传代或冻存引发污染
- 未提供完整污染检测报告前销毁细胞
