一、细胞基本属性
- 细胞名称:Li - 7人肝癌细胞
- 细胞别称:Liver - 7细胞;HCC Li - 7;人肝癌细胞系
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:成年肝癌患者(具体性别信息保密)
- 组织来源:肝脏肿瘤组织
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:上皮样,单层贴壁呈梭形或多角形
- 细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数以保证增殖活性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI 1640(含10% FBS+1%青霉素 - 链霉素+1%谷氨酰胺)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(依赖传代密度与培养条件)
- 供应限制:仅用于肿瘤机制研究或药物筛选,禁止临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴解冻后离心去冻存液,重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面,静置培养箱4小时后再观察
- 传代标准:融合度达80%-90%(建议每2 - 3天传代)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使脱落
- 注意事项:
- 传代后12小时需首次换液清除死细胞
- 建议每2代进行支原体检测
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)
- 细胞密度:冻存浓度1×10^6 cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化后离心去上清,轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮储存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测贴壁率(应≥85%)
- 功能验证:CCK - 8检测增殖曲线(P8代细胞应保持高增殖活性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 物流温度记录异常(需提供运输温度曲线)
- 到货72小时内证实真菌/细菌污染(需平板培养证据)
- 复苏后活率低于80%(需台盼蓝染色视频记录)
- STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形:
- 未使用胶原包埋培养导致贴壁失败
- 自行修改培养基成分引发代谢异常
- 实验操作污染导致交叉感染
- 未定期传代导致细胞过度老化
(注:所有操作需符合生物安全二级实验室规范,细胞特性可能因培养条件产生代际差异,建议定期进行功能验证)