一、细胞基本属性
细胞名称：LN229+LUC人胶质瘤细胞荧光素酶标记
细胞别称：LN229 - LUC；胶质瘤细胞系；荧光素酶标记胶质瘤细胞
种属来源：人（Homo sapiens）
组织来源：脑胶质瘤组织
生长特性：贴壁生长（依赖基质胶包被）
细胞形态：不规则多角形或纺锤形，核质比高
荧光标记：稳定表达萤火虫荧光素酶（Luciferase）
细胞代数：P5 - P10（经STR鉴定确保遗传稳定性）
细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS+1%青霉素 - 链霉素+150μg/mL嘌呤霉素）
培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
荧光素酶活性：≥5×10^6 RLU/sec（经荧光素底物验证）
供应限制：仅限体外研究，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理：
• 冻存管：37℃水浴解冻后接种于预涂基质胶的培养皿
• 培养瓶：移除运输液后加入5mL新鲜培养基静置培养
传代标准：融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代）
传代比例：1:3至1:6（推荐密度3×10^4 cells/cm²）
消化方法：
• 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
• 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项：
• 培养基需每48小时更换以维持荧光素酶活性
• 传代后需补充嘌呤霉素维持筛选压力
• 避免使用含萤火虫荧光素酶的实验体系干扰检测
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+20% FBS）
细胞密度：冻存浓度1×10^6 - 5×10^6 cells/mL
冻存步骤：
• 消化后离心去除胰酶，重悬于预冷冻存液
• 程序降温：4℃ 30min → - 80℃过夜 → 液氮储存
复苏验证：
• 复苏后48小时检测荧光素酶活性（不低于冻存前80%）
• 细胞形态学评估（需保持典型胶质瘤细胞特征）
• 传代稳定性验证（连续培养5代后活性衰减≤15%）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 到货干冰完全融化且细胞活性＜85%（需提供温度记录）
2. 72小时内PCR检测证实支原体污染
3. 荧光素酶活性低于标称值50%（需提供原始检测数据）
4. STR分型与数据库不匹配
不予重发情形：
1. 未使用配套基质胶导致贴壁失败
2. 中断嘌呤霉素筛选导致标记丢失
3. 未按规范进行荧光素酶活性校准
4. 液氮保存期间温度异常导致的细胞失活
