一、细胞基本属性
- 细胞名称：LOVO+LUC人结直肠癌细胞（荧光素酶标记）
- 细胞别称：LOVO - LUC；结直肠腺癌细胞；荧光素酶标记结直肠癌细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 组织来源：结直肠腺癌组织
- 生长特性：贴壁生长（需预包被基质胶或胶原）
- 细胞形态：上皮样，贴壁后呈多角形或梭形，形成致密单层
- 细胞代数：P5 - P15（推荐使用代数内保证荧光素酶稳定表达）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640培养基（含10% FBS+1%双抗+0.1mg/mL G418筛选）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
- 荧光素酶活性：≥1×10^5 RLU/秒/10^3 cells（经Luciferin底物验证）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体内外诊断
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精擦拭表面，静置培养箱4小时待细胞贴壁
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
- 37℃消化2 - 3分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项
- 传代后需维持G418筛选压力（防止荧光素酶表达丢失）
- 避免频繁传代（建议代次间隔内完成实验）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：基础冻存液（含10% DMSO+20% FBS+70%基础培养基）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心后重悬于冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：荧光素酶活性检测（48小时内需达基准值）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 7日内证实支原体/细菌污染（需提供第三方检测报告）
- 荧光素酶活性低于标称值50%（需提供原始检测数据）
- STR鉴定与数据库不匹配（需提供完整电泳图谱）
- 不予重发情形
- 未按说明书进行G418筛选导致标记丢失
- 使用非推荐培养基或血清导致细胞功能异常
- 实验操作污染（如未在超净台操作）
- 未定期检测荧光素酶活性导致数据偏差
