一、细胞基本属性
- 细胞名称：MCF - 7+luc人乳腺癌细胞（荧光素酶标记株）
- 细胞别称：MCF - 7 - Luc；人乳腺癌荧光素酶标记细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 组织来源：乳腺腺癌组织（女性患者来源）
- 荧光标记特性：稳定表达萤火虫荧光素酶（Luciferase），适用于活体成像及体外生物发光检测
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞间黏附连接）
- 细胞形态：上皮样多角形，单层贴壁后呈现典型铺路石样排列
- 细胞代数：P3 - P10（经荧光素酶活性验证的稳定传代区间）
- 细胞规格：1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS+1%双抗+0.01mg/mL胰岛素）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 增殖特性：倍增时间约48 - 72小时（依赖培养基成分及细胞密度）
- 应用范围：仅限肿瘤机制研究、药物筛选及活体成像实验（不可用于临床或动物移植）
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基接种
- 培养瓶：酒精擦拭表面后静置于培养箱1小时，待温度平衡后换液
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每3 - 4天传代）
- 传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液（含0.02% EDTA）
- 37℃消化2 - 3分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落后终止
- 注意事项：
- 避免长时间消化（防止荧光素酶表达载体丢失）
- 传代后48小时内避免强光照射以保护荧光素酶活性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及渗透压稳定剂）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁶-1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化离心后重悬于冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后24小时检测细胞活力（台盼蓝染色法，存活率≥90%）
- 荧光素酶活性检测：使用荧光素酶底物检测发光值（P5代发光强度应＞1×10⁴ RLU/μg）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供温度记录证明）
- 72小时内证实细菌/真菌污染（需提供污染检测图像）
- 荧光素酶活性缺失（需提供检测数据对比）
- STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形：
- 客户解冻后超48小时未进行传代操作
- 使用非推荐培养基导致荧光素酶表达沉默
- 未避光操作或反复冻融导致细胞损伤
- 未定期检测支原体而引发交叉污染
（注：所有操作需符合生物安全规范，实验废弃物需经灭菌处理）
