一、细胞基本属性
细胞名称:MDA - MB - 231人乳腺癌细胞
细胞别称:MDAMB231;乳腺腺癌细胞;三阴性乳腺癌细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:31岁女性乳腺癌患者(转移性胸腔积液来源)
组织来源:乳腺腺癌组织
生长特性:贴壁生长(依赖胰蛋白酶消化传代)
细胞形态:不规则上皮样,多形性,贴壁松散
细胞代数:P5 - P15(推荐使用前10代以内确保表型稳定性)
细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含胎牛血清冻存液)
培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS + 1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:含10% DMSO的胎牛血清冻存液,- 150℃以下长期保存
倍增时间:~24 - 48小时(受血清浓度及细胞密度影响)
供应限制:仅限体外研究使用,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
培养瓶:酒精消毒外壁,直接置于CO₂培养箱中静置4小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(贴壁细胞间隙明显时操作)
传代比例:1:3至1:6(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
终止消化时需添加等体积含血清培养基
传代后12小时需补加新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:90% FBS + 10% DMSO
细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
消化离心后细胞沉淀重悬于冻存液
程序降温:4℃ 30分钟 → - 80℃ 24小时 → 液氮长期保存
复苏验证:
复苏后贴壁率需≥85%(接种后24小时显微镜观察)
功能验证:Transwell侵袭实验(P8代细胞应保持高侵袭特性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输温度记录异常导致细胞团块溶解(需提供物流温度曲线)
2. 到货48小时内证实真菌/支原体污染(需提供第三方检测报告)
3. 复苏后贴壁率低于80%(需提供接种后24小时显微照片)
4. STR分型与数据库不匹配(CODIS位点一致性≥80%)
不予重发情形:
1. 使用无血清培养基或添加生长因子未备案
2. 未按规范进行细胞复苏(如常温解冻超过2分钟)
3. 实验操作导致EGFR/Vimentin表达异常
4. 未使用指定代数的细胞进行关键实验