一、细胞基本属性
- 细胞名称：MDA - MB - 435S人黑素瘤细胞
- 细胞别称：MDA - MB - 435S；乳腺腺癌细胞（注：经后续研究证实为黑素瘤来源）
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：31岁女性（原代组织供体）
- 组织来源：乳腺导管癌转移灶（现归类为皮肤恶性黑素瘤来源）
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：不规则纺锤形或多边形，部分呈现星状伪足
- 细胞代数：P5 - P15（建议使用P8前代次确保实验一致性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T75培养瓶 或 1mL冻存管（含胎牛血清冻存液）
- 培养基：Leibovitz's L - 15培养基（含10% FBS+2mM L - 谷氨酰胺）
- 培养条件：气相：100%空气（无需CO₂）；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：含10% DMSO的胎牛血清冻存液，-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约36 - 48小时（依赖培养基批次及接种密度）
- 供应限制：仅限肿瘤学研究，不可用于药物开发或诊断用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管：37℃水浴震荡解冻（60秒内完成），加8mL预温培养基离心洗涤；培养瓶：直接置于恒温培养箱，4小时后首次换液
- 传代标准：细胞融合度达70% - 80%（高密度易诱发自发分化）
- 传代比例：1:3至1:6（推荐接种密度2×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.1%胶原酶），37℃消化3 - 5分钟，终止时需机械轻拍培养瓶辅助脱落
- 注意事项：严格避免培养基pH值＞7.4（L - 15培养基无碳酸缓冲体系），传代后需添加1mM丙酮酸钠增强代谢适应性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：含20% FBS+10% DMSO的L - 15培养基
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤：4℃预冷细胞悬液10分钟，程序降温：4℃ 30min→ - 20℃ 1h→ - 80℃ 12h→液氮长期存储
- 复苏验证：复苏后48小时进行黑素瘤标志物检测（S100β/HMB - 45阳性率需＞90%），功能验证：Matrigel侵袭实验（P10代细胞应保持＞80%基线侵袭力）
四、售后服务承诺
- 重发标准：1. 运输过程温度记录异常且复苏存活率＜80%；2. 7天内经流式检测证实细胞表面GD2抗原丢失；3. STR分型与数据库存档不匹配（提供比对图谱）；4. 原代冻存批次经PCR证实存在交叉污染
- 不予重发情形：1. 使用含CO₂培养箱导致培养基碱中毒；2. 未按规范进行胶原酶辅助消化引发细胞团块；3. 擅自添加生长因子改变细胞恶性表型；4. 超过推荐代次导致的遗传漂移问题
