一、细胞基本属性
- 细胞名称：MHCC - 97H+luc人高转移性肝癌细胞（荧光素酶标记）
- 细胞别称：MHCC - 97H - luc；高转移性肝癌细胞 - luc；荧光素酶标记肝癌细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 背景信息：源自人肝癌组织，经基因修饰稳定表达荧光素酶，适用于活体成像及转移机制研究。
- 组织来源：肝癌原发灶（经病理学确认的高转移性组织样本）
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞间接触及基质支持）
- 细胞形态：不规则多边形，贴壁后呈致密片状，高转移特性显著
- 细胞代数：P5 - P15（推荐使用代数，确保荧光素酶表达稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：高糖DMEM（含10% FBS+1%双抗+荧光素酶表达维持添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 荧光素酶活性：需配合D - luciferin底物检测，活体成像前建议预实验验证信号强度
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体内治疗
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基接种。
- 培养瓶：酒精消毒表面，静置培养箱4小时适应环境。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺）。
- 37℃消化2 - 3分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落。
- 注意事项：
- 避免长时间消化（防止荧光素酶表达丢失）。
- 传代后48小时内避免检测荧光素酶活性。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及蛋白稳定剂）
- 冻存密度：1×10^6 cells/mL（每支冻存管1mL）
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，重悬于预冷冻存液。
- 梯度降温：4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存。
- 复苏验证：
- 复苏后48小时检测荧光素酶活性（需达到初始活性的90%以上）。
- 功能验证：通过小动物活体成像系统观察原位瘤或转移灶信号。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程中干冰耗尽导致细胞失活（需提供温度记录证明）。
- 到货72小时内证实支原体污染（需提供检测报告）。
- 复苏后荧光素酶活性低于标注值的80%。
- STR鉴定与标准数据库不匹配。
- 不予重发情形：
- 未按说明书使用指定培养基或添加剂。
- 细胞培养箱CO₂浓度或温度异常导致状态不佳。
- 多次冻融或长期传代后荧光素酶表达衰减。
- 未进行规范复苏操作直接用于动物实验。
