一、细胞基本属性
细胞名称:MKN - 74人胃癌细胞
细胞别称:MKN74;人胃癌细胞系
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:来源于成年男性胃癌患者
组织来源:胃腺癌组织(中等分化程度)
生长特性:贴壁生长(需胰酶消化传代)
细胞形态:多边形或梭形,核质比高,成簇贴壁
细胞代数:P4 - P10(建议使用代数内以保证表型稳定)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含完全冻存液)
培养基:RPMI - 1640(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:含10% DMSO的完全冻存液,液氮长期保存
倍增时间:约24 - 36小时(与培养密度及传代操作相关)
供应限制:仅用于科研,禁止临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬接种
- 培养瓶:酒精消毒表面后直接置入CO₂培养箱
传代标准:融合度达80% - 90%(建议隔天观察)
传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA消化液
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁使细胞脱落
注意事项:
- 避免消化过度导致细胞成团
- 首次换液建议在传代后12小时内完成
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:含10% DMSO的完全培养基
细胞密度:冻存浓度1×10^6 - 2×10^6 cells/mL
冻存步骤:
- 消化离心后重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → - 80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证:
- 复苏存活率≥90%(台盼蓝法)
- 功能验证:CCK - 8检测增殖曲线(P5代细胞应保持对数生长期特性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常(需提供物流温度记录)
2. 72小时内证实支原体污染(需第三方检测报告)
3. STR分型与数据库不匹配(提供电泳图谱)
不予重发情形:
1. 解冻后未及时接种(超过24小时)
2. 自行修改培养基成分导致细胞异常
3. 未按标准流程进行传代操作
4. 未定期进行支原体检测引发交叉污染