一、细胞基本属性
- 细胞名称:MM.1S人多发性骨髓瘤细胞
- 细胞别称:MM.1S细胞;人骨髓瘤细胞系MM.1S
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:源自67岁女性多发性骨髓瘤患者(供体临床分期为Ⅲ期)
- 组织来源:骨髓穿刺样本(浆细胞恶性增殖群体)
- 生长特性:悬浮生长(部分细胞轻微贴壁,需轻柔吹打维持单细胞状态)
- 细胞形态:圆形或类圆形,单细胞悬浮为主,偶见松散聚团
- 细胞代数:P5 - P15(建议控制传代次数以保持基因稳定性)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10%FBS+1%丙酮酸钠+2mM L - 谷氨酰胺)
- 培养条件:气相:5%CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10%DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(与细胞密度及培养基新鲜度相关)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或商业用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基。
- 培养瓶:直接置于培养箱静置2小时,避免剧烈震荡。
- 传代标准:悬浮细胞密度达1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:4(维持终密度5×10⁵ cells/mL)
- 收集方法:
- 150g离心5分钟收集细胞,弃上清后轻柔重悬。
- 轻微贴壁细胞需使用0.25%Trypsin - EDTA辅助解离(37℃孵育≤1分钟)
- 注意事项:
- 避免离心速度过高导致细胞膜损伤。
- 培养基需每周更换两次,维持pH 7.2 - 7.4。
- 聚团细胞需通过40μm细胞筛过滤。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10%DMSO+20%FBS)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集对数生长期细胞,重悬于预冷冻存液。
- 分装至冻存管后程序降温:4℃ 30min→ - 80℃ 24h→液氮长期保存。
- 复苏验证:
- 复苏后活率≥90%(台盼蓝染色法)。
- 功能验证:CCK - 8法检测48小时增殖曲线(P10代细胞增殖率应>85%)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 物流温度记录异常导致细胞失活(需提供运输温度曲线)。
- 到货72小时内证实微生物污染(需提供污染检测图像)。
- 活率低于承诺值(需提供台盼蓝染色原始数据)。
- STR分型与ATCC数据库不一致。
- 不予重发情形:
- 客户未按说明书进行细胞复苏及传代操作。
- 使用非指定培养基或添加未经验证的生长因子。
- 因实验污染导致细胞交叉感染。
- 未在液氮中长期保存导致的细胞活性下降。