一、细胞基本属性
细胞名称:人急性单核细胞白血病细胞(MonoMac6)
细胞别称:Mono - Mac - 6;MM6;单核细胞白血病细胞系
种属来源:人(Homo sapiens)
疾病背景:源自急性单核细胞白血病患者外周血单核细胞
组织来源:外周血(经EB病毒永生化处理)
生长特性:悬浮生长(部分细胞轻微贴壁倾向)
细胞形态:圆形或卵圆形单细胞,胞质丰富,核质比例高
细胞代数:P15 - P25(建议使用代次范围以保证表型稳定性)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含含血清冻存液)
培养基:RPMI 1640培养基(含10% FBS + 1%青霉素 - 链霉素+2mM L - 谷氨酰胺)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:含血清冻存液(含10% DMSO),-150℃以下长期保存
倍增时间:约48 - 72小时(依赖细胞密度与培养条件)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理:
• 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
• 培养瓶:显微镜观察细胞密度,直接补充新鲜培养基
传代标准:细胞密度达1×10^6 cells/mL(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:2至1:4(建议初始接种密度2×10^5 cells/mL)
操作方法:
• 离心收集细胞(200×g,5分钟)
• 重悬于新鲜培养基并分装至新培养瓶
注意事项:
• 避免长时间高密度培养(易引发细胞分化)
• 定期检测支原体污染(建议每3个月检测一次)
• 贴壁细胞比例超过20%时需轻柔吹打分离
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:完全培养基+10% DMSO(现配现用)
细胞密度:冻存浓度1×10^6 - 2×10^6 cells/mL
冻存步骤:
• 离心收集细胞后重悬于冻存液
• 分装至冻存管后立即转移至程序降温盒(-80℃过夜后转入液氮)
复苏验证:
• 复苏后48小时台盼蓝染色检测存活率(标准≥85%)
• 功能验证:CD14表面标志物流式检测(P20代细胞阳性率应≥90%)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度记录异常导致细胞团块溶解(需提供温度记录截图)
2. 7天内证实支原体/真菌污染(需提供第三方检测报告)
3. 复苏后活率低于80%(需提供台盼蓝染色照片)
4. STR分型与数据库不匹配
不予重发情形:
1. 使用无血清培养基或未按推荐条件培养
2. 未定期传代导致细胞自发分化(CD14表达率下降)
3. 未使用程序降温盒直接冻存造成冰晶损伤
4. 收到细胞后超72小时未进行首次换液操作