一、细胞基本属性
细胞名称:NCCIT人畸胎癌细胞
细胞别称:畸胎瘤细胞系NCCIT、人睾丸畸胎瘤来源细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:成年男性(原代供体为睾丸畸胎瘤患者)
组织来源:睾丸畸胎瘤组织
生长特性:贴壁生长(需预包被基质胶)
细胞形态:多形性特征,核质比高,可见核仁明显
细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数,确保多能性稳定)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%非必需氨基酸+1mM丙酮酸钠)
培养条件:气相为5% CO₂,温度37℃,湿度95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃液氮长期保存
倍增时间:约24 - 36小时(高增殖活性)
供应限制:仅限科学研究,不可用于临床治疗或生物医药产品开发
二、细胞培养操作指南
收货处理:冻存管需37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预温培养基;贴壁细胞瓶酒精擦拭表面后直接静置培养。
传代标准:融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:4至1:6(推荐接种密度2×10^4 cells/cm²)
消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA,37℃消化3 - 5分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止。
注意事项:避免消化过度导致分化倾向;传代后需48小时内更换培养基;维持高密度培养以防自发分化。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90%培养基)
细胞密度:建议冻存浓度1×10^6 - 2×10^6 cells/mL
冻存步骤:离心收集细胞,重悬于冻存液后分装至冻存管,程序降温:4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期储存。
复苏验证:复苏存活率≥90%(台盼蓝染色法);功能验证需通过Oct - 4/Nanog免疫荧光检测维持多能性。
四、售后服务承诺
重发标准:1.运输温度异常致细胞死亡(需提供温度记录);2.到货3天内证实支原体污染;3.STR鉴定不符;4.复苏存活率<85%。
不予重发情形:1.超72小时未复苏;2.使用非指定培养基导致分化;3.未按规范进行冻存导致反复冻融;4.自行修饰细胞基因后功能异常。