NCI-H3122人非小细胞肺癌细胞

人细胞系

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XM-X09841×10^6人细胞系2500


一、细胞基本属性

细胞名称:NCI - H3122人非小细胞肺癌细胞

细胞别称:H3122;非小细胞肺癌细胞;肺腺癌细胞

种属来源:人(Homo sapiens)

疾病背景:来源于非小细胞肺癌患者肺腺癌组织,携带EML4 - ALK融合基因变异

组织来源:肺腺癌组织

生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)

细胞形态:上皮样多角形,贴壁紧密,高密度时呈铺路石样排列

细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数以保证基因表达稳定性)

细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含无血清冻存液)

培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗)

培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%

冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存

倍增时间:~24 - 48小时(依赖培养条件及融合度)

供应限制:仅限于科学研究,不可用于临床治疗或生物体内实验


二、细胞培养操作指南

收货处理:

冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基

培养瓶:酒精消毒外壁后直接置于培养箱平衡2小时

传代标准:融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)

传代比例:1:3至1:5(推荐初始接种密度1×10^4 cells/cm²)

消化方法:

使用0.25% Trypsin - EDTA溶液(含0.02% EDTA)

37℃消化3 - 5分钟,显微镜下观察细胞间隙扩大后终止

注意事项:

传代前需平衡培养基温度至37℃

建议使用胶原蛋白包被培养皿增强贴壁效率

定期检测EML4 - ALK融合基因表达稳定性


三、细胞冻存操作规范

冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90% FBS)

细胞密度:冻存浓度:5×10^5 - 1×10^6 cells/mL

冻存步骤:

消化后离心收集细胞,轻柔重悬于冻存液

梯度降温程序:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮储存

复苏验证:

复苏后48小时内检测存活率(台盼蓝染色≥90%)

功能验证:CCK - 8法检测增殖能力(P8代细胞应维持典型生长曲线)


四、售后服务承诺

重发标准:

1. 物流温度记录异常导致细胞失活(需提供运输温度曲线)

2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供检测报告)

3. STR分型与数据库记录不符

4. 复苏后活率低于承诺值(需提供染色检测视频)

不予重发情形:

1. 未使用推荐包被基质导致贴壁失败

2. 未定期检测支原体造成实验室污染

3. 未按标准传代导致基因表达漂移

4. 超过建议代数范围继续使用