一、细胞基本属性
细胞名称
NCI - H716人结直肠腺癌细胞
细胞别称
H716细胞；结直肠腺癌细胞
种属来源
人（Homo sapiens）
疾病背景
源自结直肠腺癌患者的转移性腹水样本
组织来源
结直肠腺癌组织
生长特性
悬浮成团生长（需定期轻柔吹散细胞团块）
细胞形态
圆形或类圆形，聚集成疏松团块状
细胞代数
P5 - P10（推荐使用代数以保证基因稳定性）
细胞规格
1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基
RPMI - 1640培养基（含10% FBS + 1%双抗）
培养条件
气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），- 150℃以下长期保存
倍增时间
~48 - 72小时（依赖细胞密度与培养基状态）
供应限制
仅限科研用途，不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后加入5mL预热培养基重悬
培养瓶：直接转移至培养箱静置培养，24小时后首次换液
传代标准
细胞密度达1×10^6 cells/mL或培养基明显酸化（通常每3 - 4天传代一次）
传代比例
1:2至1:4（推荐维持密度2×10^5 - 5×10^5 cells/mL）
传代方法
收集细胞悬液离心（1000rpm，3分钟）
重悬于新鲜培养基，轻柔吹打分散团块
按比例接种至新培养瓶
注意事项
避免剧烈吹打导致细胞膜损伤
定期检测细胞团块大小（过大会影响营养吸收）
传代后48小时内避免频繁观察扰动细胞
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液（含10% DMSO及葡萄糖保护剂）
细胞密度
冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤
离心收集高活力细胞，重悬于冻存液
分装至冻存管后梯度降温：4℃ 30min→ - 80℃ 24h→液氮长期保存
复苏验证
复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率（≥90%）
功能验证：CCK - 8增殖曲线检测（P8代细胞应维持对数生长期活性）
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
2. 到货3日内证实细菌/真菌污染（需提供染色检测图像）
3. 细胞存活率低于85%（台盼蓝染色法）
4. STR分型与数据库不匹配
不予重发情形
1. 未按悬浮细胞规范进行静置培养导致细胞丢失
2. 使用非推荐离心参数造成细胞机械损伤
3. 未定期分散团块导致细胞坏死
4. 未执行标准复苏流程引发二次结晶损伤
