一、细胞基本属性
细胞名称
NCM 460人正常结肠上皮细胞
细胞别称
正常结肠黏膜上皮细胞；结肠上皮细胞
种属来源
人（Homo sapiens）
年龄性别
健康成人（性别不限，供体筛选无消化道疾病史）
组织来源
结肠黏膜组织
生长特性
贴壁生长（依赖细胞外基质包被）
细胞形态
典型单层铺路石样，接触抑制后呈多边形紧密排列
细胞代数
P3 - P8（确保功能稳定性和遗传背景一致性）
细胞规格
1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基
结肠上皮细胞专用培养基（含2% FBS及黏膜上皮生长因子）
培养条件
气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间
约48 - 60小时（受培养密度及基质影响）
供应限制
仅限科研用途，不可用于临床治疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
• 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀
• 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时
传代标准
细胞融合度达80% - 90%（建议每3 - 5天传代一次）
传代比例
1:2至1:3（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
消化方法
• 使用0.25% Trypsin - EDTA（无Ca²⁺/Mg²⁺）
• 37℃消化2 - 3分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止
注意事项
• 避免消化过度（防止紧密连接蛋白降解）
• 传代后12小时内更换新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液（含10% DMSO及渗透保护剂）
细胞密度
冻存浓度：1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
冻存步骤
• 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
• 梯度降温：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期储存
复苏验证
• 复苏后24小时台盼蓝染色存活率≥90%
• 功能验证：跨膜电阻检测（P5代细胞应保持黏膜屏障特性）
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
2. 到货72小时内证实微生物污染（需提供检测报告）
3. 复苏后存活率低于90%（台盼蓝染色法）
4. 细胞STR谱系鉴定不符
不予重发情形
1. 收货后超过72小时未进行复苏操作
2. 使用非指定培养基导致细胞状态异常
3. 自行反复冻融造成细胞损伤
4. 未按要求进行定期支原体检测
