一、细胞基本属性
细胞名称:人甲状腺正常细胞(Nthy - ori 3 - 1)
细胞别称:Nthy - ori 3 - 1;甲状腺滤泡上皮细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:健康成人(性别不限,供体无甲状腺疾病史)
组织来源:甲状腺组织
生长特性:贴壁生长(依赖贴壁基质支持)
细胞形态:单层铺路石样,接触抑制后呈多边形
细胞代数:P4 - P10(确保功能稳定性与遗传背景一致性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640(含10% FBS + 1%非必需氨基酸+1%丙酮酸钠)
培养条件:气相:5% CO₂+ 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
倍增时间:~48 - 60小时(依赖培养密度与传代比例)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:冻存管需37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基混匀离心;培养瓶经75%酒精擦拭后静置培养箱1小时平衡。
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每3 - 5天传代一次)。
传代比例:1:2至1:4(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)。
消化方法:使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA(含0.02% EDTA),37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止。
注意事项:避免消化过度损伤膜蛋白;传代后12小时更换培养基以去除残留酶。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂)。
细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
冻存步骤:离心收集细胞后重悬于冻存液,梯度降温程序:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期储存。
复苏验证:复苏后24小时台盼蓝染色存活率≥90%;功能验证需通过甲状腺球蛋白分泌检测(P5代细胞应保持基础分泌能力)。
四、售后服务承诺
重发标准:运输温度异常导致细胞死亡(需提供干冰包装状态证明);3日内证实支原体/细菌污染(需提供检测报告);细胞活力低于85%(台盼蓝法);STR鉴定与描述不符。
不予重发情形:延迟复苏超过48小时;使用非指定培养基导致状态异常;未规范操作导致反复冻融损伤;未按要求进行污染检测直接实验。