一、细胞基本属性
1. 细胞名称：ProPakA.6人胚肾细胞
2. 细胞别称：HEK - 293亚系；ProPakA.6细胞；胚肾上皮细胞
3. 种属来源：人（Homo sapiens）
4. 组织来源：胚胎肾组织（经基因工程改造表达SV40大T抗原）
5. 生长特性：贴壁生长（需包被含胶原蛋白的培养基底）
6. 细胞形态：不规则多边形，核质比高，贴壁后呈单层铺展
7. 细胞代数：P5 - P15（推荐使用代数内维持稳定转染特性）
8. 细胞规格：1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
9. 培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS+1%双抗+1%谷氨酰胺）
10. 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
11. 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
12. 增殖特性：持续增殖型（SV40永生化特性）
13. 应用范围：基因表达研究、病毒包装、重组蛋白生产（需符合生物安全规范）
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：表面消毒后直接置于37℃培养箱平衡4小时
2. 传代标准：细胞融合度达90% - 95%（推荐每2 - 3天传代一次）
3. 传代比例：1:4至1:6（依据实验需求调整接种密度）
4. 消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 室温消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
5. 注意事项：
- 避免过度传代导致SV40抗原表达不稳定
- 换液时保留部分条件培养基以维持细胞适应性
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方：基础培养基+20% FBS+10% DMSO
2. 冻存密度：1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL（依据实验用途优化）
3. 冻存程序：
- 梯度降温：4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存
- 冻存管需标注细胞代次、冻存日期及操作者信息
4. 质检标准：
- 复苏存活率≥85%（台盼蓝染色法）
- 转染效率验证：每批次提供EGFP报告基因对照数据
四、售后服务承诺
1. 质量保障：
- 到货72小时内提供STR鉴定比对报告
- 每批次随附支原体检测阴性证明
- 冻存细胞复苏存活率承诺≥80%
2. 重发条款：
- 液氮运输罐出现温度异常（需提供温度记录仪数据）
- 到货48小时内证实微生物污染（需第三方检测报告）
- STR位点匹配率＜85%（需提供原始测序文件）
3. 免责声明：
- 未按ATCC操作规范进行细胞培养
- 擅自使用非推荐转染试剂导致特性改变
- 超过推荐代次引发的功能异常
