一、细胞基本属性
- 细胞名称:REH人急性非B非T淋巴细胞白血病细胞
- 细胞别称:REH细胞;急性淋巴细胞白血病细胞系;ALL细胞系
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:10岁男性患者(原代取材自复发期外周血)
- 组织来源:外周血单核细胞层
- 生长特性:悬浮聚团生长(部分贴壁亚群需轻吹分散)
- 细胞形态:球形或卵圆形,直径10 - 14μm,核质比高
- 细胞代数:P15 - P25(经STR验证遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含血清冻存液)
- 培养基:RPMI 1640(含10%热灭活FBS+1%丙酮酸钠)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:含血清冻存液(10% DMSO+90% FBS),-150℃长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(对数生长期细胞密度维持1 - 5×10⁵ cells/mL)
- 供应限制:仅限肿瘤机制研究,禁止用于药物筛选或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴解冻后,加入5mL培养基离心去冻存液
- 培养瓶:静置培养箱30分钟后轻摇重悬
- 传代标准:细胞密度达8×10⁵ cells/mL或培养基明显酸化(pH<6.8)
- 传代比例:1:3至1:5(维持密度2×10⁵ - 5×10⁵ cells/mL)
- 操作方法:
- 直接离心收集细胞(无需消化酶处理)
- 重悬时轻柔吹打避免细胞团聚集
- 注意事项:
- 培养基需每2天半量更换
- 定期检测CD19/CD7/CD33表面标记(建议每3代流式验证)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:完全培养基+10% DMSO
- 细胞密度:冻存浓度5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤:
- 4℃预冷细胞悬液与冻存液等体积混合
- 程序降温:4℃ 30min → -80℃ 24h → 液氮长期存储
- 复苏验证:
- 复苏后48小时台盼蓝染色存活率≥85%
- 功能性验证:CCK - 8检测72小时增殖曲线应呈对数增长
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 干冰运输全程≤-70℃仍出现细胞团溶解(需物流温度记录)
- 72小时内证实真菌/细菌污染(需平板培养证据)
- 细胞复苏存活率<80%(需视频记录染色过程)
- STR分型与ATCC数据库不符
- 不予重发情形:
- 未按推荐密度进行传代导致细胞分化
- 未使用热灭活血清引发支原体污染
- 离心转速超过300g造成机械损伤
- 培养箱CO₂浓度波动超过±2%导致细胞酸化死亡(注:本产品需在生物安全二级实验室操作,建议定期进行支原体检测并记录细胞传代史)