一、细胞基本属性
- 细胞名称:SAOS - 2人成骨肉瘤细胞(SAOS - 2 Human Osteosarcoma Cells)
- 细胞别称:SAOS - 2细胞;成骨肉瘤细胞系
- 种属来源:人(Homo sapiens)
- 年龄性别:11岁女性(供体临床诊断为骨肉瘤)
- 组织来源:骨组织(原发肿瘤组织分离)
- 生长特性:贴壁生长(需胶原包被培养器皿)
- 细胞形态:不规则多边形,部分呈梭形,细胞间连接松散
- 细胞代数:P4 - P10(建议使用前5代进行功能实验)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含血清型冻存液)
- 培养基:McCoy's 5A Modified Medium(含15% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:含血清冻存液(含10% DMSO+90% FBS),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~72 - 96小时(受细胞密度及传代方法影响)
- 供应限制:仅限肿瘤机制研究,不可用于药物筛选或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基;培养瓶:酒精消毒后直接置于培养箱,24小时内勿移动
- 传代标准:细胞融合度达70% - 80%(高密度易诱导自发分化)
- 传代比例:1:3至1:4(建议接种密度1×10^4 cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25%胰酶 - 0.53mM EDTA混合消化液;37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项:消化终止需加入2倍体积含血清培养基;传代后48小时更换培养基以清除死亡细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:血清型冻存液(含20% FBS+10% DMSO)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤:预冷冻存管至4℃,细胞悬液分装后密封;程序降温:4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮长期保存
- 复苏验证:复苏后48小时检测贴壁率(应≥80%);功能验证:碱性磷酸酶活性检测(P3代细胞应维持成骨分化潜能)
四、售后服务承诺
- 重发标准:1.运输温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度曲线);2.7天内证实真菌/支原体污染(需提供第三方检测报告);3.复苏后贴壁率低于70%(需提供明场显微照片);4.STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形:1.未使用胶原包被培养器皿导致细胞脱落;2.培养基未添加必要生长因子引发异常分化;3.消化时间超过10分钟造成膜蛋白损伤;4.未按规范进行定期支原体预防性处理